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991.
人巨细胞病毒gB基因真核表达载体在小鼠中的免疫效果 总被引:2,自引:0,他引:2
目的观察人巨细胞病毒(HCMV)gB基因真核表达载体在小鼠中的免疫效果。方法大量提取目的质粒,分3个剂量组进行多点肌肉注射免疫小鼠,利用MTT法检测免疫小鼠的T细胞增殖活性,ELISA法检测小鼠血清中HCMV特异性抗体,中和试验检测小鼠血清中和抗体。结果ELISA检测结果表明,与空白对照、空载体对照组相比,3个剂量组pcD-NA3.1/gB质粒免疫后小鼠血浆中抗HCMV IgG抗体水平均明显增高(P<0.05),中和抗体水平为1∶20~1∶40,而对照组血清中无中和抗体存在。淋巴细胞增殖指数免疫小鼠与正常小鼠差异无显著意义。结论已构建的HCMV gB基因真核表达载体可以诱导小鼠产生明显的体液免疫,为核酸疫苗研究奠定了基础。 相似文献
992.
目的分析绿脓杆菌重组毒素的分泌表达机理。方法将所构建的6种绿脓杆菌重组毒素的分泌表达质粒,即pET-20b-IL-1023-57-PE40、pET-20b-EGF-PE40、pET-20b-LHRH-PE35、pET-20b-EGF-PE38、pET-20b-MSH-PE40和pET-20b-LHRH-PE40分别转化至Rosetta(DE3)中,进行IPTG诱导表达。结果只有LHRH-PE40和LHRH-PE35能分泌表达。LHRH-PE35表达产物经Westernblot检测,可被特异抗体识别。经DNAStar和ANThewin蛋白分析软件对6种PE重组毒素性质进行比较分析发现,并不是所有PE重组毒素融合信号肽序列后,就能分泌表达,其中导向部分的性质决定了PE重组毒素是否分泌表达。结论对绿脓杆菌重组毒素的分泌机理已有初步了解。 相似文献
993.
994.
β-甘露聚糖酶的基因与表达 总被引:2,自引:0,他引:2
β-甘露聚糖酶(EC 3.2.1.78)是一类能够水解含β-1,4-D-甘露糖苷键的内切水解酶,属于半纤维素酶类。水解的底物有半乳甘露聚糖、葡萄甘露聚糖、半乳葡萄甘露聚糖和甘露聚糖,产物有少量的单糖和2~10个单糖分子构成的寡糖。在纸浆漂白,饲料加工,食品加工等方面具有广阔的应用前景。文章综述了近年来国内外对β-甘露聚糖酶的基因序列、分子的结构区域、基因克隆和表达方面的研究进展。 相似文献
995.
天花粉蛋白突变体TCS_(KR173-174CG)的构建、表达与纯化 总被引:1,自引:1,他引:1
目的构建天花粉蛋白(TCS)突变体基因,并进行表达及纯化。方法应用计算机预测TCS分子上可能的抗原决定簇,并进行定点突变。以栝楼基因组DNA为模板,经PCR扩增突变基因,与pRSET-A表达载体连接,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,并对表达产物进行Ni-NTA层析纯化。结果目的蛋白在大肠杆菌中获得高效可溶性表达,表达产物经纯化后,得到均一的TCS突变体蛋白。结论已成功构建了TCS突变体基因,并获得高效表达。 相似文献
996.
禽流感病毒核蛋白基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 以 1株H5N1 亚型禽流感病毒RNA为模板扩增NP全基因cDNA ,并在大肠杆菌中进行表达。方法 提取禽流感病毒RNA ,以RT PCR法扩增编码NP基因cDNA并测序 ,将其克隆到pET 2 8a原核表达载体 ,并在大肠杆菌BL2 1(DE3)plysS中表达 ,用SDS PAGE和Westernblot检测表达产物。结果 所克隆的核苷酸片段包含了核蛋白基因完整阅读框架 ,编码 4 98个氨基酸 ,构建的重组表达载体在大肠杆菌BL2 1(DE3)plysS中表达出相对分子质量约为 5 5 0 0 0的重组蛋白 ,该重组蛋白具有良好的免疫原性。结论 已成功克隆和表达了禽流感病毒核蛋白基因 ,为禽流感新型免疫学诊断试剂的研制奠定了基础 相似文献
997.
目的克隆、表达人肌红蛋白基因,并制备人肌红蛋白多克隆抗体。方法应用RT-PCR方法从人骨骼肌总RNA中扩增肌红蛋白基因(hMb)编码序列,克隆入原核表达载体pRSETc中,并在大肠杆菌E.coliBL21(DE3)中诱导表达。表达产物经亲和层析和凝胶层析纯化。纯化蛋白免疫小鼠,制备多克隆抗体,并用Westernblot检测其特异性。结果测序表明RT-PCR所得的肌红蛋白基因hMb序列与GenBank(NM203377)中报道的序列一致。该基因在大肠杆菌E.coliBL21(DE3)中获得高效可溶性表达,表达产物经纯化,获得电泳纯的蛋白。重组人肌红蛋白的表达水平达12.8%。每升发酵液中可获得纯化的目的蛋白6.438mg。Western blot分析表明该蛋白为融合有6个His的hMb蛋白。ELISA法测得抗体效价为1∶12800,Western blot证实其具有较好的特异性。结论已成功克隆人肌红蛋白基因,在大肠杆菌中获得了可溶性表达,并制备了抗人肌红蛋白的多克隆抗体。 相似文献
998.
适应度评价大体可以分成解码和计算适应度值两个部分, 是进化计算中运算量最大、重复率最高的过程之一。为了有效利用已有计算结果的角度避免大量重复建树和遍历运算, 改进了GEP解码算法基本流程以降低GEP的运算量, 达到了提升运算效率的目的。采用仿真的方式对引入复用机制的GEP和传统GEP算法进行了对比实验, 从解码次数、解码所用时间等两个方面进行对照, 发现引入复用机制的GEP算法在解码次数上比传统GEP有多个数量级的优势, 在解码所需时间上也有较大的改进。 相似文献
999.
1000.